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支原体DNA提取试剂盒
点击次数：3013 发布时间：2020/10/14 12:51:53
支原体检测的核酸法，已广泛应用于细胞支原体筛查和生物制品企业的生产放行检测中。
但在使用PCR方法检测支原体之前，由于有些待检样品的成分过于复杂，或含有的某些成分会抑制PCR反应的进行，因此需要使用『支原体DNA提取试剂盒』提前做DNA的提取工作。
对于生物药或需遵循药典的样本，也由于样品基质可能会影响检测的灵敏度，因此需要样本做DNA抽提处理，实现核酸法的灵敏度。
这里向您推荐德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒
英文品名：
Venor®GeM Sample Preparation Kit
该试剂盒已经过多方广泛验证，有很多引用文献；
它已达到欧洲药典标准，可用于PCR或qPCR检测支原体的方法学验证。
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产品信息：
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产品特点
1）符合欧洲药典的要求。
2）采用离心管柱的方法，全程只需30分钟。
2）从细胞上清和生物制品中，均可分离支原体DNA。
3）洗脱DNA纯度高，体积50μl，保证PCR的灵敏度。
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操作步骤
四步法：
1）细胞裂解
2）DNA吸附到核酸纯化柱上
3）去除残留污染物和抑制剂
4）DNA洗脱
试剂盒组分：
Spin columns（核酸纯化住）
Collection tubes（收集管）
Conditioner液
Binding Buffer液
Buffer A1液
Buffer A2液
Buffer E液
操作示意图：
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所需其他材料及仪器：
- ＞96%无水乙醇
- EP管（1.5ml或2ml）
- 离心机和恒温仪（用于1.5ml 或2ml 离心管）
- 移液器及带滤芯吸头（100μl 和1000μl）
- 可选：蛋白酶K（货号56-0002），用于处理富含蛋白（＞10mg/ml）的样品。
- 可选：DNA 内控对照，用于配合
Venor®GeM Classic Kit（货号11-1025）
以保证操作过程没有问题。
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注意事项：
1. 支原体DNA 提取试剂盒一次可从*多含有1X 106 细胞/ml 的细胞上清中直接分离DNA。
2. 富含蛋白的样本（蛋白含量＞10mg/ml）可能需要蛋白酶K 处理后，再抽提DNA。
3. 此试剂盒不适于提取真核细胞组织的DNA。
4. 若在提取DNA时加入了内控DNA对照，则在支原体核酸法检测时不需要再加内控对照。我们推荐使用对照，以验证结果的可靠性，也有助于排除故障。
5. 不要使用其他酒精来替代乙醇，它将导致核酸产量的下降。
6. 缓冲液E（Buffer E）的预热，会显著改善核酸的产量。
原创作者：北京缔一生物科技有限公司
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