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Biocoll细胞分离液的使用方法
点击次数:12058 发布时间:2017/6/20 14:21:54
Biocoll细胞分离液含有一种高分子聚合物,分子量约为400000道尔顿。本文威正翔禹/缔一生物为您分析Biocoll细胞分离液的使用方法。
Biocoll细胞分离液采用亲水多聚体,密度为1.1g/mL,如要寻求*佳pH和渗透压,可用酸碱(如泛影酸和NaOH)调整。Biocoll分离液中的两种,密度分别为1.077g/ml (货号L6113,100ml;L6115,500ml)和1.090g/ml (货号L6125),均已调好。另一种密度为1.10g/ml(L6155,500ml)。
使用Biocoll分离淋巴细胞:
1) 分别将7mL和10mL Biocoll细胞分离液(D=1.077g/mL, 20℃)放入15mL和25mL的离心管中。
2) 将肝素化抗凝全血(50U/mL肝素,无稳定剂)与等体积培养基混合均匀,小心添加在Biocoll细胞分离液的液面上。
3) 1200g离心20min。
4) 用巴斯德吸管吸取(70-100%)淋巴细胞富集层(位于血浆和Biocoll之间),加入培养基中洗2次,
*300g离心10min。
*200g离心10min
即得所需淋巴细胞,可以按常规方法进行细胞计数等实验。
建议使用范围:
科研使用
储存:
2-8℃ 避光
补充说明:
这两种分离液均为即用型,已调好生理渗透压和pH值。
附1:血细胞在连续密度梯度中的分布
附2:用PBS稀释Biocoll储存液的推荐量(温度:20℃)
PBS应不含Ca2+、Mg2+,因为这些离子会导致细胞聚集和成团。
原创作者:北京缔一生物科技有限公司
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